FISH

FISH (Fluorescence In Situ Hybridization) là một kỹ thuật di truyền tế bào phân tử được sử dụng để phát hiện và định vị sự hiện diện hoặc khiếm khuyết của các trình tự DNA cụ thể trên nhiễm sắc thể. Bằng cách sử dụng các đầu dò huỳnh quang chỉ liên kết với những phần của nhiễm sắc thể theo cách bổ sung trình tự DNA.

Kỹ thuật này cho phép các nhà nghiên cứu và bác sĩ lâm sàng hình dung và lập bản đồ vật liệu di truyền trong tế bào của một cá thể, bao gồm các gen hoặc một phần gen cụ thể.

Cách thức hoạt động

1. Chuẩn bị mẫu: Các tế bào được cố định trên một phiến kính.
2. Biến tính: DNA trong tế bào được biến tính (tháo xoắn) để trở thành chuỗi đơn.
3. Lai: Các đầu dò DNA được đánh dấu huỳnh quang được thêm vào. Các đầu dò này bổ sung cho trình tự DNA mục tiêu.
4. Rửa: Các đầu dò dư thừa được rửa sạch.
5. Hình ảnh hóa: Dưới kính hiển vi huỳnh quang, các đầu dò phát sáng, cho thấy vị trí của DNA mục tiêu.

Ứng dụng trong Y học và Nghiên cứu

• Chẩn đoán Ung thư: Phát hiện các bất thường nhiễm sắc thể như chuyển đoạn, mất đoạn hoặc khuếch đại (ví dụ: HER2 trong ung thư vú).
• Rối loạn di truyền: Xác định các tình trạng như hội chứng Down, Prader-Willi hoặc hội chứng DiGeorge.
• Xét nghiệm trước sinh: Sàng lọc các bất thường nhiễm sắc thể ở thai nhi.
• Nhận dạng vi khuẩn: Phát hiện vi khuẩn hoặc virus cụ thể trong các mẫu lâm sàng.

Ưu điểm

• Độ đặc hiệu và độ nhạy cao.
• Có thể sử dụng trên các tế bào không phân chia.
• Trực quan và tương đối nhanh.

Hạn chế

• Yêu cầu kiến thức trước về trình tự mục tiêu.
• Độ phân giải hạn chế so với các kỹ thuật mới hơn như giải trình tự thế hệ tiếp theo (next-generation sequencing).